如何驗證自動細胞計數(shù)儀：使用驗證載玻片的益處

關(guān)鍵詞：自動細胞計數(shù)儀、細胞計數(shù)準確性、細胞計數(shù)儀驗證載玻片、ISO 20391 標準、細胞計數(shù)參考材料、細胞計數(shù)技術(shù)、LUNA 細胞計數(shù)儀系列、細胞計數(shù)驗證、細胞活力評估

1 引言

自動細胞計數(shù)儀因其能夠快速、精確地提供細胞計數(shù)結(jié)果而廣受歡迎。盡管有這些優(yōu)點，但驗證其準確性以確?？煽康募毎嫈?shù)結(jié)果至關(guān)重要。微球常被用于驗證流式細胞儀和自動細胞計數(shù)儀等設(shè)備。但使用微球存在各種問題，促使了細胞計數(shù)儀驗證載玻片的研發(fā)，用于驗證點成LUNA™細胞計數(shù)儀系列。

在本文中，我們將探討細胞計數(shù)標準，以及使用細胞計數(shù)儀驗證載玻片來驗證點成LUNA™細胞計數(shù)儀系列的優(yōu)勢。

2 國際細胞計數(shù)標準

ISO 20391 標準的制定是為了為準確的細胞計數(shù)提供指導(dǎo)，并確保細胞計數(shù)結(jié)果的可靠性。該標準概述了一種通過系列稀釋實驗來驗證細胞計數(shù)測量質(zhì)量的方案，當沒有參考材料時可以使用該方案。然而這個過程可能既耗時又復(fù)雜，需要進行復(fù)雜的計算來確定決定系數(shù)和比例系數(shù)。

為了克服這一挑戰(zhàn)，建議使用參考材料以確保測量的可追溯性、便于進行比較并驗證測量過程。有效的方法是將平均分析結(jié)果與從有證參考材料中獲得的參考值進行比較，從而無需進行復(fù)雜的計算。盡管如此，選擇合適的參考材料仍然面臨挑戰(zhàn)。

3 使用驗證微球作為參考材料的挑戰(zhàn)

驗證微球，如美國國家標準與技術(shù)研究院（NIST）微球，常被用作涉及粒徑和計數(shù)的各種分析方法中的參考材料。這些微球具有已知的大小和濃度，常被用作流式細胞術(shù)、顯微鏡檢查和其他類似技術(shù)的校準標準。但是NIST 微球沒有熒光形式，不適合測試細胞活力。

雖然商用熒光微球可以作為替代，但移液過程中的誤差以及長期儲存期間的蒸發(fā)可能會影響其準確性，這需要小心處理和反復(fù)測試。因此目前沒有可用于細胞活力評估的商用參考材料。

選擇自行在內(nèi)部制備參考材料的用戶將不得不依賴手動計數(shù)，手動計數(shù)相對不精確，并且需要大量的樣本。或者可以使用流式細胞術(shù)，盡管獲得計數(shù)結(jié)果可能具有挑戰(zhàn)性，這種方法不太方便用戶操作。因此需要找到一種替代的細胞活力評估方法。

4 使用驗證載玻片作為參考材料

使用具有穩(wěn)定性和一致性的參考材料對于確保細胞計數(shù)的準確結(jié)果至關(guān)重要。一種能夠提供這種質(zhì)量控制水平的選擇是使用驗證載玻片。這些載玻片包含預(yù)先點樣的圖案或預(yù)先固定的熒光微球，上面有已知數(shù)量的物體，消除了諸如因樣本加載導(dǎo)致的濃度變化、儲存期間的蒸發(fā)或分布不均等問題。

此外，驗證載玻片允許使用細胞計數(shù)儀的明場和熒光光學(xué)系統(tǒng)來驗證總細胞計數(shù)和細胞活力。與其他設(shè)備進行交叉驗證也很簡單，并且其穩(wěn)定性確保即使長期儲存或反復(fù)使用，測量值也能保持一致。通過使用驗證載玻片，研究人員可以節(jié)省原本用于進行額外實驗以確保準確性的時間和資源。

（A）       細胞計數(shù)儀驗證載玻片 —— 明場 II 型 （B）細胞計數(shù)儀驗證載玻片 —— 熒光型

5 如何使用細胞計數(shù)儀驗證載玻片評估準確性

細胞計數(shù)儀驗證載玻片方案通過提供一種簡單而高效的替代微球的方法，簡化并改進了驗證細胞計數(shù)儀準確性的過程。這種方法節(jié)省了時間，并提供了一種簡便的方法來驗證細胞計數(shù)結(jié)果的準確性。

要使用細胞計數(shù)儀驗證載玻片方案，請按照以下簡單步驟操作：

1)       檢查細胞計數(shù)儀驗證載玻片標簽上的細胞濃度和細胞活力值。

2)       將載玻片插入細胞計數(shù)設(shè)備中。

3)       使用 “IQOQ" 方案開始計數(shù)。

4)       記錄總細胞濃度和細胞活力值。

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